题目：骨形态发生蛋白（BMP-2）与男性肝炎后肝硬化相关骨营养不良的研究

选题依据、目的与意义

我国是全球感染病毒性肝炎人数最多的国家，达到1.3亿人口，其中相当一部分患者会进展至肝硬化。目前，国内外均有研究及文献报道肝炎后肝硬化患者中大部分合并有相关骨营养不良及骨质疏松症。然而，关于骨形态发生蛋白（BMP-2）与男性肝炎后肝硬化相关骨营养不良的研究报告尚不多见。因此，我们拟对这一课题进行研究，以期揭示BMP-2与男性肝炎后肝硬化相关骨营养不良发病机制之间的关系。

国内外研究现状

关于慢性肝病患者合并不同程度骨质疏松症（OP）目前国内外均有相关的研究报道。据不同文献报道，慢性肝病合并OP的发生率为12%-55%，骨折发生率为5%-20%。由于慢性肝病病因不同，研究方法、研究群体的差异，使OP的发生率报道不一。慢性病毒性肝炎、肝硬化引起的骨密度异常目前尚缺乏大规模的临床流行病学研究报道。

1. 国外：
2. Schiefke等测量了43例慢性病毒性肝炎患者的骨密度，发现骨密度下降25例（58%），诊断OP8例（19%）。
3. Cijevschi等的研究显示在93例肝炎后肝硬化患者中，发生骨量减少或骨质疏松的比例为32.3%。
4. Wang等分析17例乙型肝炎肝硬化的骨活检结果，发现82.4%存在骨质疏松。
5. Crawford等研究113例肝硬化患者得到结论为：骨转换率随病情加重而加速。

6. Sokhi等测定104例肝硬化患者BMD发现不同阶段肝硬化患者均存在骨密度下降的现象。

7. 国内：

8. 王义国等观察61例乙型肝炎肝硬化患者的骨密度，发现普遍并骨量减少。
9. 付明生等研究显示乙型肝炎后肝硬化患者明显存在有骨营养不良。
10. 马新秋等研究了肝硬化Child分级与骨密度及骨代谢的关系，提示慢性病毒性肝炎、肝硬化患者易合并OP。

病毒性肝病相关性骨质疏松的发生机制相当复杂，尚未完全明了。多位学者对其发病机制进行过相关综述，包括维生素D和钙代谢异常、营养不良、性腺功能减退等。近年研究发现多种细胞因子如IL-1、IL-6、TNF-α、IGF-1参与了骨代谢过程。

研究内容范围

本课题研究所选入组对象均为成年男性，研究组及对照观察组的入组对象均排除内分泌系统和肾脏系统疾病。立题出发点主要考虑排除性别因素所导致的干扰，通过对比入组对象骨形态发生蛋白（BMP-2）水平，期待发现男性肝炎后肝硬化合并骨质疏松患者血清BMP-2水平与对照组的差别。我们遵循世界卫生组织推荐的QCT骨密度测量仪检测骨密度值作为判定骨质疏松依据，通过检测左侧桡骨下1/3处骨密度值进行比照后，通过对数据比较分析，希望得到男性肝炎后肝硬化患者骨密度下降与BMP-2含量之间存在相关联的直接依据。

实施及实验方案

1. 研究对象组：

2. 拟选取2012年10月-2014年2月在我院肝病科明确诊断为肝炎后肝硬化的男性住院患者35例，所选病例均排除肾脏、内分泌系统疾病。

3. 对照观察组：

4. 选取2012年10月-2014年2月于我院门诊进行体检的普通男性健康人群数量30名，排除肝病、肾脏疾病及内分泌系统疾病。

应用方法

1. 应用美国雅培制药有限公司生产的试剂经放免法检测研究组与对照组的血清甲状旁腺素（PTH）及降钙素（CT）并与正常临床参考值进行比照。应用日本东芝全自动生化仪检测血清Ca2+及碱性磷酸酶（ALP）并记录检测结果。

2. 血样采集及进行BMP-2的检测：

3. 取研究对象组和对照观察组清晨空腹静脉血，肝素抗凝，分离血清，加入抑肽酶防止蛋白降解，置于-80℃冷冻保存。BMP-2的检测采用酶联免疫吸附实验（ELISA），试剂盒由深圳精美生物制品有限公司代理，具体操作严格按照说明书。

4. 应用QCT骨密度测量仪检测研究组与对照组的左侧桡骨下1/3处骨密度值进行比照。

统计方法

数据用x±s表示，组间比较采用t检验，p<0.05有统计学意义。

查阅主要文献

1. Raisz LG. Pathogenesis of osteoporosis: concepts, conflicts, and prospects. J Clin Invest 2005; 115: 3318-3325
2. Goral V, Simsek M, Mete N. Hepatic osteodystrophy and liver cirrhosis. World J Gastroenterol 2010; 16: 1639-1643
3. Collier J. Bone disorders in chronic liver disease. Hepatology 2007; 46: 1271-1278
4. Schiefke I, Fach A, Wiedmann M, et al. Reduced bone mineral density and altered bone turnover markers in patients with non-cirrhotic chronic hepatitis B or C infection. World J Gastroenterol 2005; 11: 1843-1847
5. Cijevschi C, Mihai C, Drug VL, et al. Osteoporosis in liver cirrhosis--overview. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi 2005; 109: 700-704
6. Wang YG, Liu Q, Wang WQ, et al. A clinical study of abnormal bone metabolism in patients with HBV liver cirrhosis. Zhonghua Ganzangbing Zazhi 2006; 14: 33-36
7. Crawford BA, Kam C, Donaghy AJ, et al. The heterogeneity of bone disease in cirrhosis: a multivariate analysis. Osteoporos Int 2003; 14(2): 987-994
8. Sokhi RP, Anantharaju A, Kondaveeti R, et al. Bone mineral density among cirrhotic patients awaiting liver transplantation. Liver Transpl 2004; 10(1): 648-653
9. 王义国，刘倩，王文奇等。乙型肝炎肝硬化骨代谢异常的临床研究【J】中华肝脏病杂志，2006,14(1): 33-36
10. 付明生，黄英，祝杰。乙型肝炎肝硬化肝性骨营养不良的临床研究【J】胃肠病学和肝病学杂志，2011,20(2)
11. 马新秋，田桂华。肝硬化患者骨密度及骨代谢变化分析【J】中华综合医学杂志，2005,6(11): 970-971