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发布时间:2024-10-21 12:09:34
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研究一:
目的: 分选CD105+滑膜间充质干细胞(SMSCs),观察其增殖和向软骨细胞分化的能力。
方法: 通过酶消化滑膜组织分离SMSCs,并使用流式细胞仪分选CD105+ SMSCs。在第3天和第7天采用WST-1法测定SMSCs的增殖能力;软骨诱导21天后进行免疫组织化学染色,检测蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。
结果: 酶消化后得到的SMSCs呈星形或梭形,分选后形态无明显变化。免疫荧光显示,分选组CD105+细胞较未分选组明显增多。WST-1增殖检测显示,两组细胞在第3天(0.376±0.012 vs 0.329±0.012)和第7天(0.581±0.009 vs 0.524±0.007)的吸光度值差异具有统计学意义(P < 0.05)。软骨诱导培养21天后,分选组甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原染色均较未分选组更深,表明CD105+ SMSCs合成更多软骨细胞外基质。
结论: CD105+ SMSCs具有较强的增殖和成软骨能力,可作为软骨组织工程的优良种子细胞。
研究二:
目的: 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的可能性。
方法: 使用密度梯度法分离培养兔BMSCs,并取第3代(P3)细胞。实验组使用含TGF-β1的诱导培养基,对照组则不含TGF-β1,体外培养两周。使用阿尔新蓝法(Alcian blue)检测培养基内葡糖胺聚糖(GAG)含量,并在第14天通过实时定量PCR检测髓核样细胞Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及聚集蛋白多糖(Aggrecan) mRNA的基因表达;同时通过免疫组织化学法测定CollagenⅡ的含量变化。
结果: GAG检测结果显示,实验组在第7、10、13天的GAG含量均显著高于对照组(P < 0.01)。CollagenⅡ免疫组织化学染色结果显示,实验组的表达量较对照组更高。实时定量PCR结果证实,实验组CollagenⅡ和Aggrecan mRNA表达水平显著高于对照组(P < 0.01)。
结论: TGF-β1能显著增加BMSCs向髓核样细胞分化的生物活性,促进其定向分化为髓核样细胞。
研究三:
目的: 观察老鹳草素对地塞米松诱发大鼠骨质疏松症的影响。
方法: 将6个月龄雌性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、5、10、20 mg/kg老鹳草素组和2 mg/kg阿仑膦酸钠组。大鼠肌肉注射地塞米松(1 mg/kg),老鹳草素连续灌胃90天,对股骨和腰椎进行骨密度及骨组织形态计量学检测。
结果: 对照组股骨和椎骨骨密度分别为(0.20±0.01)和(0.18±0.01) g/cm2,模型组分别为(0.15±0.01)和(0.10±0.01) g/cm2,差异具有统计学意义(P < 0.05)。与模型组比较,10、20 mg/kg老鹳草素能显著提高股骨和椎骨的骨密度。5 mg/kg老鹳草素可增加模型组大鼠股骨骨小梁表面积百分率、骨小梁间距和骨小梁节点数;10、20 mg/kg老鹳草素显著增加模型组大鼠股骨和椎骨骨小梁计数、骨小梁宽度和骨小梁表面积百分率,增多小梁节点数,减少骨小梁间隙距离和小梁游离末端数。
结论: 老鹳草素具有抑制地塞米松引起大鼠骨质疏松症的作用,并呈现剂量-效应关系。
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